我州林科所“中藏藥-甘松”項目基于四川農(nóng)業(yè)大學(xué)分子實驗室,經(jīng)過多次實驗探索,初步建成甘松組織培養(yǎng)無菌體系,為后期甘松增殖培養(yǎng)與生根培養(yǎng)奠定了基礎(chǔ),也標(biāo)志著甘松組織培養(yǎng)工作取得階段性成果。
甘松組織培養(yǎng)無菌體系建立的重點在于甘松外植體部位的選定。前期實驗分別選用了甘松的根(根芽、根芽莖、根莖),莖(莖基、莖段)及芽進行組織培養(yǎng),結(jié)果表明甘松莖基的萌發(fā)率最高,因此選用甘松莖基作為外植體。將外植體切段放入45℃溫水吐溫10分鐘,再用流水沖洗1小時;然后將沖洗好的外植體置于超凈臺上用無菌水沖洗1次,再用75%酒精浸泡15秒,之后用0.1%升汞溶液浸泡8~10 分鐘;接著用無菌水沖洗1次后接種到空白MS培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)。
項目組將用接種成活的甘松組培苗進行增殖培養(yǎng),即以MS培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基,將生長健壯的組培苗從莖基部切取,重新接種到新的培養(yǎng)基中進行增殖培養(yǎng),當(dāng)材料增殖到一定數(shù)量后,再進行生根培養(yǎng)。
甘松組織培養(yǎng)是甘松繁育體系中的重要內(nèi)容,通過“中藏藥-甘松”項目實驗研究,掌握組織技術(shù)后,將呈現(xiàn)兩方面效益:一是組織培養(yǎng)利用植株個體進行無性繁殖可避免大量采集草本植物甘松種子難度大的制約;二是此項研究相對傳統(tǒng)的種子繁殖,可加快繁殖效率,保護生態(tài)環(huán)境,拓寬中藏藥產(chǎn)業(yè)化發(fā)展中的種苗供應(yīng)途徑。